En els tractaments de fecundació in vitro (FIV), ja sigui una FIV convencional o una ICSI, els embrions es conreen en el laboratori durant uns dies per a poder decidir quin o quins seran transferits a l'úter i quins seran congelats (vitrificats). Per a poder prendre la decisió, cal valorar la seva qualitat durant totes les etapes del desenvolupament embrionari.
En funció del dia del desenvolupament de l'embrió, els embriòlegs analitzen diferents característiques per a determinar quina és la seva qualitat i si són susceptibles d'implantar per a acabar donant lloc a un embaràs. Si per contra els embrions són de mala qualitat, podrien detenir el seu desenvolupament, provocar una fallada d'implantació o fins i tot causar un avortament en els primers mesos d'embaràs.
En el laboratori de fecundació in vitro, els embrions passen un màxim de 6 dies en cultiu, passant de ser un zigot d'1 dia a un blastocist de 5 o 6 dies amb multitud de cèl·lules.
A continuació tens un índex amb els 7 punts que tractarem en aquest article.
- 1.
- 2.
- 2.1.
- 2.2.
- 2.3.
- 2.4.
- 2.5.
- 3.
- 3.1.
- 3.2.
- 3.3.
- 4.
- 5.
- 5.1.
- 5.2.
- 5.3.
- 5.4.
- 5.5.
- 5.6.
- 5.7.
- 5.8.
- 6.
- 7.
Com i per a què es mesura la qualitat embrionària?
En els processos de FIV-ICSI, en els quals la fecundació dels òvuls es duu a terme en el laboratori, és important valorar la qualitat dels embrions resultants.
És habitual que s'obtingui més d'un embrió, per la qual cosa la seva classificació ajuda a triar quins embrions d'entre tots els que hi ha en cultiu tenen major probabilitat d'implantar i donar lloc a un embaràs. Així, la classificació embrionària es tindrà en compte per a la transferència, ja que els embrions de major qualitat seran els que s'introduiran a l'úter matern.
L'avaluació de la qualitat dels embrions requereix tenir en compte diferents característiques de la seva morfologia, és a dir, de la seva forma o aspecte, i l'evolució al llarg dels dies que romanen en cultiu. Per a poder fer això existeixen dues opcions:
- Treure els embrions de l'incubador cada dia durant uns minuts per a poder valorar-los al microscopi.
- Valorar els embrions mitjançant un sistema time-lapse, que permet obtenir imatges cada pocs minuts per a poder valorar el seu desenvolupament complet sense treure'ls de l'incubador.
La primera alternativa és el mètode tradicional, mentre que el segon és una incorporació recent als laboratoris de reproducció assistida. L'ús de sistemes time-lapse permet al embriólogo observar tot el desenvolupament embrionari, no sols els moments puntuals en els quals es faria l'observació en el microscopi. Així mateix, l'avaluació morfològica dels embrions amb Time-Lapse evita els canvis de temperatura i gasos que es produeixen en treure els embrions de l'incubador, reduint l'estrès i millorant la viabilitat embrionària.
Primers dies de desenvolupament embrionari
Ja sigui mitjançant visualització directa sota el microscopi o amb el sistema time-lapse, els embrions són valorats gairebé tots els dies fins que són transferits o congelats.
En funció del dia, els embriólogos hauran de fixar-se en els uns o els altres aspectes referents a la morfologia embrionària per a poder anar classificant-los.
A continuació, parlarem d'aquests dies de desenvolupament i com s'espera que sigui l'aspecte dels embrions.
Embrió en dia 1: zigot
El dia després de la fecundació (dia 0) cal confirmar si els òvuls han fecundat amb l'aparició del primer estadi embrionari: el zigot o zigot.
Es tracta d'una única cèl·lula que encara no ha començat a dividir-se i en la qual s'ha d'observar els següent:
- Presència de dos pronuclis (PN), un procedent de l'òvul i un altre de l'espermatozoide.
- Presència de dos corpuscles polars (CP), indicatiu que després de la fecundació s'ha completat la meiosi de l'òvul.
- Aspecte del citoplasma del zigot, que ha de ser uniforme i clar.
Per a evitar fallades d'interpretació, és important fer aquesta valoració entre les 16 i 18 hores després de la inseminació in vitro o la microinjecció. Si els zigots s'observen més tard podrien haver desaparegut els pronuclis, ja que aquest esdeveniment és necessari perquè tingui lloc la primera divisió que donarà lloc a l'embrió de dues cèl·lules.
L'existència dels 2 PN confirma que hi ha hagut fecundació. Si s'observen 1 o 3 pronuclis l'embrió ha de ser descartat, ja que indica que la dotació genètica de l'embrió no és adequada. El seu desenvolupament en els pròxims dies es produeix d'igual forma que en els embrions viables, per la qual cosa és important visualitzar-los abans que es produeixin la fusió de PN i no siguem capaces de distingir els embrions viables dels no viables.
Embrió en dia 2: quatre cèl·lules
Als dos dies de l'inici del desenvolupament, l'embrió ja ha tingut dues divisions i estarà format per 4 cèl·lules, anomenades blastòmeres. Tant el número de blastòmeres com l'aspecte de les mateixes en aquest moment serà decisiu en la classificació. Observar menys o més de 4 cèl·lules és indicatiu de retard o acceleració del desenvolupament.
L'observació dels embrions en aquest moment del desenvolupament ha de fer-se entre les 44 i 45 hores postinseminació, parant esment principalment als següents aspectes:
- Número i simetria de les blastòmeres
- les 4 cèl·lules han de ser aproximadament d'igual grandària.
- Nombre de nuclis
- cada cèl·lula ha de tenir únicament un nucli. Si tenen dos, serien binucleadas, i si tenen més de dos, multinucleades. Si tenen més d'un nucli es consideren anormals i s'associen amb errors de divisió cel·lular.
- Percentatge de fragmentació
- els fragments són petits restes de citoplasma procedents d'una divisió anormal de les blastòmeres. Són importants la quantitat, la distribució i el volum dels fragments, ja que poden comprometre el desenvolupament de l'embrió.
- Presència de vacúols
- els vacúols són com a "bossetes" plenes de líquid. Si són grans o nombroses poden influir negativament en la qualitat embrionària.
- Forma i gruix de la zona pel·lúcida
- ha de ser rodona i no massa gruixuda ni prima. Alteracions de la zona pel·lúcida s'associen amb baixes taxes d'implantació, ja que a l'embrió li serà difícil desprendre's d'ella per a implantar.
Algunes de les alteracions embrionàries influeixen en major mesura en la capacitat d'implantació de l'embrió, per la qual cosa en funció d'això s'assignarà l'una o l'altra categoria de qualitat.
Embrió en dia 3: vuit cèl·lules
Per a analitzar la qualitat embrionària en dia 3, es valoren els embrions entre les 68 i les 69 hores postinseminació. En aquest moment, s'analitzen els mateixos paràmetres que s'han considerat en dia 2 de desenvolupament, així com el ritme de divisió.
Els embrions de millor qualitat seran aquells amb 7-8 cèl·lules procedents d'embrions de 4 cèl·lules en dia 2.
Els embrions es poden transferir en aquest moment del desenvolupament o es poden mantenir en l'incubador fins a dia 5 o 6 per a transferir-los en estadi de blastocist. Així mateix, els embrions que no es transfereixin es poden vitrificar en aquest moment o en dia 5 o 6 de desenvolupament.
Embrió en dia 4: mòrula
A partir del quart dia de desenvolupament, es produeix el fenomen de la compactació per a formar una mòrula. És un procés pel qual les cèl·lules de l'embrió formen unions estretes entre elles i l'embrió adquireix l'aspecte d'una mora.
Encara que alguns embrions poden presentar signes de compactació de manera primerenca en dia 3, l'habitual és observar la mòrula entre 90 i 94 hores postinseminació (dia 4 del desenvolupament). Aquest moment aporta poca informació sobre l'estat de l'embrió, doncs en haver-se compactat totes les seves cèl·lules no és possible explicar-les ni observar altres trets distintius.
Així i tot en els embrions en estadi de mòrula es valoren els següents aspectes:
- Nombre de cèl·lules
- l'embrió ha de tenir més de 8 cèl·lules. Normalment, no és possible explicar-les a causa de la compactació.
- Grau de compactació
- si la compactació està en una fase primerenca, s'observen unions entre les membranes de les cèl·lules però aquestes es poden distingir les unes de les altres; mentre que si la compactació està avançada ja no és possible distingir les cèl·lules. La compactació ha de ser completa, és a dir, ha d'afectar a totes les cèl·lules de l'embrió. Si és parcial significa que alguna cèl·lula ha quedat exclosa i és signe de mal pronòstic.
- Fragments i vacúols
- si s'observa alguna d'aquestes dues estructures, pot ser que l'embrió o part d'ell estigui degenerant.
L'embrió òptim en dia 4 és aquell que compleix les següents característiques: té més de 8 cèl·lules, està compactat o compactant i la compactació afecta a tot el volum de l'embrió.
Embrió en dia 5 o 6: blastocist
Entre les 114 i 118 (dia 5) o les 136-140 hores (dia 6) postinseminació ens trobem davant un blastocist, l'últim estadi del desenvolupament embrionari que pot tenir lloc en el laboratori.
La formació del blastocist és imprescindible perquè pugui ocórrer la implantació de l'embrió en l'úter, per la qual cosa la seva formació en cultiu es considera de bon pronòstic.
Aquests embrions presenten dues estructures claus en la seva morfologia:
- La massa cel·lular interna (MCI)
- originarà les capes embrionàries que donaran lloc als òrgans del bebè
- El trofoectodermo o massa cel·lular externa
- originarà la placenta.
Totes dues estructures es distingeixen per l'aparició del blastocele: la cavitat central plena de líquid.
Per a valorar la qualitat dels blastòcits es tenen en compte paràmetres similars als proposats per Gardner en 1998:
- El grau d'expansió
- de menor a major grau (de l'1 al 5).
- L'estat de la MCI
- grandària, forma i compactació. La valoració es fa assignant 4 lletres (A, B, C, D).
- L'estat del trofoectodermo
- estructura i nombre de cèl·lules. També s'assignen 4 lletres (A, B, C, D).
El gruix de la zona pel·lúcida també és important. Aquesta ha de tornar-se més prima per a permetre l'expansió del blastocist i la seva sortida per a implantar en l'endometri. Una zona pel·lúcida fina es relaciona amb bona qualitat embrionària i amb alta probabilitat d'implantació.
Categories de qualitat embrionària
Actualment, els embrions es classifiquen per categories en funció de la seva qualitat morfocinética.
Tant els embrions en dia 3 com els blastòcits poden ser classificats, però de manera diferent, ja que l'estructura embrionària també és diferent en tots dos estadis.
Qualitat dels embrions primerencs
Els següents graus de qualitat s'assignen als embrions en dia 2 o dia 3 de desenvolupament en funció dels diferents paràmetres esmentats en l'apartat anterior:
- Categoria A o 1
- embrions d'excel·lent qualitat, amb màxima capacitat d'implantació.
- Categoria B o 2
- embrions de bona qualitat, amb alta capacitat d'implantació.
- Categoria C o 3
- embrions de qualitat intermèdia, amb una capacitat d'implantació mitjana.
- Categoria D o 4
- embrions de mala qualitat, amb baixa capacitat d'implantació.
Qualitat dels blastòcits
Per a valorar els blastòcits, com ja hem vist, la classificació embrionària habitual disposa d'un número i 2 lletres: el número (de l'1 al 5) indica el grau d'expansió del blastocist; la primera lletra (A, B, C o D), la qualitat de la massa cel·lular interna; i la segona (A, B, C o D), la del trofoectodermo. Així, els blastòcits amb millor morfologia i amb major capacitat d'implantació serien els 3AA.
Les categories numèriques assignades segons l'expansió són les següents:
- Grau 1
- blastocist primerenc (BT) en el qual es comença a veure el blastocele.
- Grau 2
- blastocist cavitat (BC) en el qual es visualitzen perfectament les diferents parts del blastocist.
- Grau 3
- blastocist expandit (BE). El blastocist ha augmentat la seva grandària i la zona pel·lúcida és fina.
- Grau 4
- blastocist iniciant eclosió (hatching), és a dir, el blastocist comença a sortir de la zona pel·lúcida.
- Grau 5
- blastocist fet eclosió (hatched). El blastocist ja ha sortit de la zona pel·lúcida.
Quant a la massa cel·lular interna, les 4 categories serien les següents:
- Categoria A nombroses
- cèl·lules formant una estructura compacta.
- Categoria B
- nombroses cèl·lules no compactades.
- Categoria C
- poques cèl·lules.
- Categoria D
- cèl·lules amb signes de degeneració.
D'altra banda, el trofoectodermo ha de tenir una sola capa. Segons l'estat de les seves cèl·lules, es classifica de la següent manera:
- Categoria A homogeni,
- cohesionat i amb moltes cèl·lules.
- Categoria B
- homogeni i amb menys cèl·lules.
- Categoria C
- poques cèl·lules.
- Categoria D
- cèl·lules amb signes de degeneració.
En el següent vídeo, el embriólogo Jose Luis De Pablo ens comenta què es té en compte a l'hora de valorar els blastòcits:
En el blastocist es valoren dues parts fonamentals: la massa cel·lular interna, que donarà lloc a l'embrió, i el trofoectodermo, capa de cèl·lules que donarà lloc a la placenta.
Depenent del nombre de cèl·lules, la compactació de la massa cel·lular interna i de la disposició d'aquestes cèl·lules, es donarà la categoria final del blastocist.
Nova catalogació de blastòcits
L'Associació per a l'Estudi de la Biologia de la Reproducció (ASEBIR) ha proposat una nova classificació embrionària que dóna major pes a la morfologia del trofoectodermo respecte a la de la massa cel·lular interna.
En ella, la qualitat s'assigna amb una sola lletra (A, B, C o D) que engloba l'estat tant de la massa cel·lular interna (MCI) com del trofectodermo. Així, si la MCI és de qualitat A i el trofoectodermo és de qualitat B, la valoració global del blastocist seria B.
Tant en la catalogació convencional com en la nova, en cas que s'emportin els embrions a cultiu llarg per a la seva transferència en estadi de blastocist, serà necessari tenir en compte la classificació en estadi primerenc (dies 2 i 4) així com la que presenti en dia 5/6 per a la seva valoració global.
Així mateix, és important tenir en compte que la valoració embrionària és, en moltes ocasions, molt subjectiva, per la qual cosa pot haver-hi variacions entre laboratoris.
La reproducció assistida, com qualsevol tractament mèdic, requereix que confiïs en la professionalitat dels metges i la clínica que triïs, ja que, evidentment, no tots són iguals.
Aquesta "eina" t'enviarà un informe totalment personalitzat, amb la informació detallada del tractament que necessites, les clíniques de la teva zona que compleixen els nostres criteris de qualitat i els seus pressupostos. A més, inclou consells que et seran de gran utilitat a l'hora de fer les primeres visites a les clíniques.
Entrevista al Dr. Gorka Barrenetxea i Edurne Martínez
En en següent vídeo, el Dr. Gorka Barrenetxea, especialista en Ginecologia i Obstetrícia, i la embrióloga Edurne Martínez ens expliquen com es valora la qualitat dels embrions en el laboratori, així com la importància de fer una bona selecció embrionària per a aconseguir l'èxit.
Preguntes dels usuaris
A què es refereix el terme blastocist primerenc?
L'estadi de blastocisto es caracteritza perquè les cèl·lules es col·loquen de manera que en una zona de l'embrió s'acumula un grup cel·lular, la qual cosa es denomina massa cel·lular interna i donarà lloc a l'embrió i al fetus que posteriorment veurem en les ecografies. Mentre que la resta de l'embrió queda envoltat d'una filera de cèl·lules que donaran lloc a les membranes i la placenta, la qual cosa anomenem el trofoectodermo. I en la zona central apareix una zona sense cèl·lules amb un líquid en el seu interior, que es denomina blastocele i que donarà lloc al líquid amniòtic.
La diferència entre en blast primerenc i un blast expandit, és que, en el primer cas, es comença a intuir la separació d'aquestes tres parts, apareixent inicialment el blastocele que diferencia dos grups cel·lulars, un que donarà lloc a la massa cel·lular interna i un altre al trofoectodermo. En aquest estadi el blastocisto no està clarament expandit i per tant les zones no es diferencien clarament. Aquest estadi embrionari sol començar a veure's al final del quart dia o a l'inici del cinquè.
Llegir més
Quina probabilitat d'embaràs hi ha amb 2 embrions de qualitat A?
Dos embrions de qualitat A tenen una probabilitat alta d'implantar sempre que els altres factors implicats siguin correctes (endometri, transferència…). Podem concloure que la taxa d'embaràs per a aquests embrions pot superar el 70% quan les condicions són les correctes.
En dia 3, quina qualitat té un embrió 8 II?
Correspondria a un embrió de 8 cèl·lules de categoria II o B, per la qual cosa és de bona qualitat, encara que no excel·lent. Les taxes d'implantació d'aquests embrions són altes, així que hi hauria una elevada probabilitat d'embaràs.
És possible fer una transferència d'embrions de qualitat D?
Aquest tipus d'embrions tenen una baixa probabilitat d'implantar, ja que la seva qualitat és dolenta. Tenen signes de degeneració, alteracions morfològiques greus com a alta fragmentació o vacuolització, o un ritme de divisió anormal. És convenient evitar transferir aquest tipus d'embrions però si no hi ha cap altre de millor qualitat es poden transferir. Encara que les possibilitats siguin baixes, podrien donar lloc a un embaràs.
Quina qualitat ha de tenir un embrió per a poder congelar-lo?
No tots els embrions són capaços de sobreviure als processos de congelació i descongelació. Els embrions de millor qualitat tenen majors taxes de supervivència, per la qual cosa és preferible congelar aquells de qualitat A i B, encara que també es poden congelar els de tipus C. No obstant això, si la parella no té embrions de millor qualitat, es poden arribar a congelar fins i tot els de tipus D, però això no ho fan en tots els centres per la seva baixa probabilitat de supervivència. En la majoria dels casos el que es fa amb els embrions de mala qualitat és deixar-los fins a dia 5-6 en cultiu (en "observació") per a veure com evolucionen.
És major la qualitat d'un embrió de 8 cèl·lules o de 6?
Els embrions òptims en dia 2 són els que tenen 4 cèl·lules, mentre que en dia 3 són aquells de 8 cèl·lules. Tenir més o menys cèl·lules, com hem vist al llarg de l'article, suposa que l'embrió no és d'excel·lent qualitat.
En cas de tenir 6 cèl·lules, l'embrió es classificaria en la categoria C, tant si és de dia 2 com de dia 3. En cas de tenir 8 cèl·lules, caldrà valorar quantes tenia en dia 2. Així, si escau d'un embrió de 4 cèl·lules en dia 2, serà de qualitat A, mentre que si tenia 6 cèl·lules serà de categoria C.
Els embrions de qualitat AA sempre donaran embaràs?
Aquest tipus de classificació correspon a un blastocisto d'excel·lent qualitat, amb una massa cel·lular interna i un trofoectodermo de bon aspecte. Té una alta capacitat d'implantació i, per tant, una elevada probabilitat de donar lloc a un embaràs. No obstant això, no es pot garantir que la dona es vagi a quedar embarassada. Que la qualitat embrionària sigui bona influeix moltíssim en la implantació, però també afecten altres factors com l'estat de l'endometri en el moment de la transferència, l'edat de la mare o la causa d'infertilitat.
Quines són les causes de la mala qualitat embrionària?
Hi ha diversos factors tant intrínsecs com extrínsecs que poden influir en la qualitat embrionària, com són:
- L'edat materna avançada
- L'endometriosi
- El factor masculí sever
- La síndrome d'ovari poliquístic
- L'obesitat
- Els protocols d'estimulació
- Les condicions de cultiu
Encara així, és difícil saber quina és la causa específica que podria afectar un cas en concret en dones de bon pronòstic i amb bona salut reproductiva.
Fem un gran esforç per oferir-te informació de màxima qualitat.
🙏 Si us plau, comparteix aquest article si t'ha agradat. 💜💜 Ens ajudes a seguir!
Bibliografia
Abeyta M, Behr B. Morphological assessment of embryo viability. Semin Reprod Med. 2014 Mar;32(2):114-26.
Amorocho B, Gómez E, López D, Santana A, Martinez JC, Landeras J. Cultivo prolongado del embrión hasta blastocisto: cultivo secuencial. In J Remohí, A Cobo, JL Romero, MJ de los Santos, A Pellicer (eds) Manual Práctico de Esterilidad y Reproducción Humana. Laboratorio de reproducción asistida. 2008. Editorial McGraw-Hill / Interamericana de España, S.A.U. 3ª edición, pp.225 - 230.
Glujovsky D, Farquhar C, Quinteiro Retamar AM, Alvarez Sedo CR, Blake D. Cleavage stage versus blastocyst stage embryo transfer in assisted reproductive technology. Cochrane Database Syst Rev. 2016 Jun 30;(6):CD002118.
Lundin K, Ahlström A. Quality control and standardization of embryo morphology scoring and viability markers. Reprod Biomed Online. 2015 Oct;31(4):459-71.
Mercader A, Buendía P, Gámiz P, Albert C. Valoración morfológica del blastocisto. In J Remohí, A Cobo, JL Romero, MJ de los Santos, A Pellicer (eds) Manual Práctico de Esterilidad y Reproducción Humana. Laboratorio de reproducción asistida. 2008. Editorial McGraw-Hill / Interamericana de España, S.A.U. 3ª edición, pp. 231 - 236.
Meseguer M, Herrero J, Tejera A, Hilligsøe KM, Ramsing NB, Remohí J. The use of morphokinetics as a predictor of embryo implantation. Hum Reprod. 2011 Oct;26(10):2658-71.
Preguntes dels usuaris: 'A què es refereix el terme blastocist primerenc?', 'Quina probabilitat d'embaràs hi ha amb 2 embrions de qualitat A?', 'En dia 3, quina qualitat té un embrió 8 II?', 'És possible fer una transferència d'embrions de qualitat D?', 'Quina qualitat ha de tenir un embrió per a poder congelar-lo?', 'És major la qualitat d'un embrió de 8 cèl·lules o de 6?', 'Els embrions de qualitat AA sempre donaran embaràs?' i 'Quines són les causes de la mala qualitat embrionària?'.
Autors i col·laboradors
