Cultiu d’embrions en el laboratori de fecundació ‘in vitro’ (FIV)

El cultiu embrionari és una de les fases més importants i decisives dels tractaments de fecundació in vitro.

En aquesta fase, els embrions són cultivats al laboratori de FIV (fecundació in vitro) i les condicions d'aquest estan molt controlades ja que influeixen directament en les taxes d'èxit dels tractaments.

El temps que romanen els embrions en cultiu pot variar, però l'habitual són 5 dies. A partir d'aquest moment, es procedeix a la transferència embrionària i/o vitrificació dels embrions viables.

A continuació tens un índex amb tots els punts que tractarem en aquest article.

Quan es realitza el cultiu embrionari?

El cultiu en el laboratori de fecundació in vitro comença després d'obtenir els òvuls mitjançant la punció fol·licular. Inicialment, es conrearan sense llevar la capa de cèl·lules de la granulosa que ho envolten (decumulació).

En funció de la tècnica de FIV aplicada per a fecundar els òvuls, el següent pas serà:

FIV convencional

s'ajunten els òvuls sense decumular amb els espermatozoides.

ICSI

es decumulen els òvuls i es realitza la microinjecció intracitoplasmàtica dels espermatozoides.

Punció ovàrica i dia 0 de desenvolupament embrionari

El cultiu dels embrions obtinguts després de la fecundació s'estendrà fins al dia en què els embrions:

• Siguin transferits a l'úter matern, que generalment és en dia 3 o en estadi de blastocist (dia 5-6).
• Es vitrifiquin.
• Es descartin.

Opcions durant el cultiu embrionari

Cal destacar que aquells embrions sobrants que siguin vitrificats poden tenir diferents destinacions també: ús propi en el futur, donar-los a la investigació, cedir-los a altres parelles amb finalitats reproductives o el cessament de la seva conservació quan hagi finalitzat l'etapa reproductiva de la dona.

Etapes del desenvolupament embrionari

A continuació veurem breument quins estadis avaluen els embriòlegs per a seleccionar l'embrió que té més probabilitats d'implantar:

Dia 1

és el dia posterior a la punció fol·licular i és quan es valora, 16-18h després de la fecundació, si aquesta ha ocorregut correctament. En aquest estadi, els embrions reben el nom de zigots . Les necessitats metabòliques que té són molt semblants a les dels ovòcits.

Dia 2

els embrions ja han realitzat les primeres divisions i tenen 2-4 cèl·lules, també conegudes amb el nom de blastómeres .

Dia 3

en aquest moment, els embrions tenen unes 6-8 blastómeres. L'embrió ja ha començat a expressar els seus propis gens, per la qual cosa les seves necessitats energètiques van canviant gradualment.

Dia 4

l'embrió es troba en estadi de mòrula i es compacta.

Dies 5 i 6

en aquests dies, l'embrió aconsegueix l'estadi de blastocist. Els embrions que arriben a aquesta etapa amb bones característiques morfològiques tenen altes probabilitats d'implantar.

Etapes del desenvolupament embrionari

No obstant això, no tots els embrions arriben fins al dia 5-6 de desenvolupament. Existeixen diversos motius pels quals els embrions es poden aturar en qualsevol punt del seu desenvolupament, però el més habitual és que el desenvolupament embrionari es bloquegi a causa de la presència d'alguna anomalia genètica en l'embrió.

Com ha de ser el cultiu?

Pot haver-hi algunes variacions en les característiques del cultiu embrionari entre diferents clíniques o fins i tot personalitzar-se per a cada pacient.

No obstant això, sempre coincideixen que les condicions han d'estar perfectament regulades, ja que qualsevol alteració pot afectar el desenvolupament embrionari i comprometre les probabilitats d'èxit del tractament.

Tipus

Depenent de la durada del cultiu, es distingeix entre:

• Cultiu curt: fins al dia 2 o 3 de desenvolupament.
• Cultiu llarg: fins a l'estadi de blastocist. Pot utilitzar-se el mateix tipus de mitjà durant tot el desenvolupament (mig únic) o utilitzar diversos diferents (mig seqüencial).

Quins tipus de cultius embrionaris existeixen?

Que es realitzi un tipus de cultiu o un altre depèn de diversos factors, com la quantitat d'òvuls obtinguts, la qualitat dels embrions en dia 3 o la necessitat de realitzar un diagnòstic genètic preimplantacional (DGP).

En alguns casos, també es realitza el co-cultiu, que consisteix a conrear els embrions amb cèl·lules endometrials per a millorar les condicions del mitjà i, així, el desenvolupament. No obstant això, és una tècnica poc comuna en clínica i s'utilitza més en el camp de la recerca.

Condicions necessàries

Els òvuls i embrions han d'estar en un ambient el més estable possible. Per a això, es mantenen a l'interior d'incubadors durant la major part del temps, ja que així les condicions de cultiu no s'alteren. Es controlen aspectes com:

• Temperatura
• Concentració de diòxid de carboni i d'oxigen
• Humitat

Condicions necessàries per a conrear embrions en un incubador

A més, també és necessari que els laboratoris de reproducció assistida tinguin unes condicions molt controlades. Alguns dels factors que es regulen són:

• Puresa de l'aire (amb molt poques partícules en suspensió)
• Llum
• Temperatura
• Gasos presents i en quin percentatge

Mitjans de cultiu per a embrions

Els embrions es desenvolupen en plaques amb mitjans de cultiu que els proporcionen els nutrients necessaris perquè evolucionin correctament. Com ja hem comentat, les seves necessitats energètiques varien en els diferents estadis. Depenent de la seva composició, distingim:

Mitjans seqüencials

contenen els nutrients específics que necessiten els embrions en determinades etapes del seu desenvolupament. Sol haver-hi un mitjà per als dos primers dies del desenvolupament embrionari i un altre per a utilitzar a partir del tercer dia.

Mitjans únics

contenen tots els nutrients que necessita l'embrió des del dia un de desenvolupament fins a l'estadi de blastocist. L'embrió anirà consumint el que necessiti a cada moment.

Entrevista a María De les Heras

En el següent vídeo, la embriòlega María De les Heras de la clínica Reproducció Bilbao ens parla del cultiu d'embrions en el laboratori de FIV, de quins són les condicions idònies i dels avanços en els últims anys.

Preguntes dels usuaris

En quins pacients es recomana el cultiu llarg?

Si fos possible, l'ideal seria realitzar-ho sempre. Al llarg de 5-6 dies de cultiu, valorarem tots els esdeveniments embrionaris que han d'anar succeint (divisions, compactació, blastulació etc.), aquests ens permeten una millor selecció embrionària, que es tradueix en una major taxa d'implantació i embaràs. Si a més a aquest cultiu li apliquem la tecnologia time-lapse, obtindrem més informació per a una selecció embrionària encara millor.

Com puc saber les probabilitats que tinc que els meus embrions arribin a blastocist?

Des del punt de vista clínic les dones joves i sense patologia, tenen mes probabilitats de tenir embrions que arribin a blastocist i des del punt de vista del laboratori aquells embrions de bona qualitat que compleixen correctament amb els temps de divisió cel·lular i mantenen una morfologia perfecta en el seu desenvolupament primerenc, també tenen mes probabilitats d'arribar a blastocist.

Què és millor, el cultiu curt o el llarg?

Depèn de cada cas, ja que cada tipus de cultiu ofereix una sèrie d'avantatges i inconvenients. D'una banda, és més fàcil dur a terme el cultiu curt i, si no es disposa de molts embrions, és més probable que arribi algun al dia de la transferència.

D'altra banda, mitjançant el cultiu llarg podem seleccionar millor quin és l'embrió amb més probabilitats d'implantar, ja que solament els que són de bona qualitat arriben a aquest estadi.

Per tant, a cada pacient li interessarà més un cultiu o un altre depenent de les característiques del seu cas.

En tots els laboratoris es tenen les mateixes condicions?

No, ja que els paràmetres que li van millor a una clínica poden no ser els que li van millor a una altra. Per exemple, en alguns laboratoris obtenen millors resultats utilitzant baixes concentracions d'oxigen en els incubadors, mentre que uns altres no veuen diferències significatives.

Els òvuls es conreen igual que els embrions?

Existeixen algunes diferències en la composició dels mitjans de cultiu que s'utilitzen en uns i en uns altres, però en general les condicions són molt similars.

A pesar que tots dos són molt delicats, els òvuls són extremadament sensibles als canvis de temperatura, per la qual cosa cal evitar d'una manera especial els canvis bruscos en manipular-los des del moment de la punció fol·licular.

Lectura recomanada

El cultiu ens permet avaluar l'evolució dels embrions, que és un aspecte clau a l'hora d'aconseguir l'embaràs mitjançant un tractament de FIV. Per exemple, sabies que la valoració dels zigots (dia 1 de desenvolupament) és fonamental per descartar alguns embrions amb càrrega cromosòmica anormal? Pots trobar més informació sobre aquest tema en el següent enllaç: Com es classifiquen els embrions segons el seu dia de desenvolupament?

En els últims anys, hi ha hagut una millora molt important en el camp de la valoració embrionària gràcies a l'aplicació de la tecnologia time-lapse en el cultiu. Ens permet visualitzar el desenvolupament embrionari contínuament i sense alterar les condicions de cultiu, proporcionant molta informació nova. Si vols llegir més sobre aquesta tècnica, et recomanem que llegeixis aquest article: Què és l''time-lapse'?

Bibliografia